在压电生物传感器表面进行生化反应的另一种方法是在线测量(insitumeasurement),所有的步骤都在液体中进行,对传感器的变化进行实时的监控。通常的做法是将传感器固定在流动腔中,传感器一面封闭,另一面与流动的液体接触,这样传感器就能直接在液体中反应。液体流动控制通常是使用流动注射分析系统,加样、反应、清洗的全部过程都能自动完成。
在线测量的好处是可以实时检测反应的情况,这对反应动力学的研究十分关键。对许多反应,比如免疫反应、核酸杂交反应,传统的检测方法是加标记,反应后检测标记物。这些方法都不能实时的记录数据。而用压电生物传感器的方法,既不需要标记,又可以实时检测,因此有显著的优点。
在压电生物传感器的研究中,有的研究者还将压电传感的方法和其它检测技术结合起来。这样作能得到全方位、多维的信息,还可以对压电传感器的数据进行补充、校正。
压电生物传感器需要首先在表面固定一层生物活性单元,即敏感膜。敏感膜具有选择性,能与待测物质发生特异性的结合。固定方法是传感器制作的关键技术,它既要使敏感膜牢固的固定在晶体表面,又要保持生物分子的活性。固定方法决定着传感器的稳定性、灵敏度、选择性等性能。通常用到的固定方法有以下几种:物理吸附、交联、自组装膜。
物理吸附物理吸附是一种较为简单的固定技术,在生物传感器的应用中经常被采用。首先研究了一些有机物在金表面的吸附,随后的研究还包括人体免疫血清蛋白抗体、的直接吸附。物理吸附具有无需试剂,活化和清洗的步骤少的特点。但对溶液的温度、pH值等条件比较敏感,而且固定的生物分子容易从表面脱离。
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